Ampicillin – 氨苄青霉素钠盐溶液（100mg/ml，50ml 配制）

Ampicillin – 氨苄青霉素钠盐溶液（100mg/ml，50ml 配制）

产品用途

Ampicillin（氨苄青霉素）是分子生物学中最常用的β-内酰胺类抗生素之一，用于LB培养基等细菌培养基中的抗性筛选。Ampicillin通过抑制细菌细胞壁合成发挥杀菌作用，携带氨苄抗性基因（bla）的转化子可表达β-内酰胺酶，水解氨苄青霉素从而在含药培养基中存活。本产品为100mg/ml高浓度储备液，适用于氨苄抗性质粒转化子的筛选、蓝白斑筛选（配合X-Gal/IPTG）等实验，是大肠杆菌分子克隆中最经典的筛选抗生素。

核心组分及终浓度（100mg/ml）

• 100mg/ml Ampicillin（氨苄青霉素钠盐）

配制方法（50ml 体系）

1. 称取 5g Ampicillin（氨苄青霉素钠盐），置于50ml离心管中。

2. 加入约 40ml 灭菌去离子水，充分混合至完全溶解。

3. 加灭菌去离子水定容至 50ml，轻轻颠倒混匀（忌剧烈震荡以防变性）。

4. 使用 0.22μm无菌滤器过滤除菌。

5. 在超净台内小份分装（1ml/份），-20℃避光保存。

各组分功能详解

使用方法

• LB/Amp筛选培养基：在高压灭菌后冷却至50～60℃的LB培养基中，按1:1000比例加入（每1L培养基加入1ml 100mg/ml Ampicillin），终浓度100μg/ml。

• LB/Amp平板：同上述方法，在铺制平板前加入Ampicillin，混匀后铺板。

• 蓝白斑筛选：在含Ampicillin的LB平板上，同时加入X-Gal和IPTG进行蓝白斑筛选。

• 使用参考：通常使用终浓度50～100μg/ml（大肠杆菌），不同菌株或质粒抗性水平可能不同，建议预实验确定最佳浓度。

关键操作要点

• 过滤除菌（最重要）：Ampicillin不耐高温，不可高温高压灭菌，必须使用0.22μm无菌滤器过滤除菌。高温会导致抗生素降解失活。

• 无菌操作：称量和溶解过程建议在超净台内操作，使用校准分析天平精确称量，防止污染。

• 避免剧烈震荡：Ampicillin溶液在剧烈震荡时可能发生结构改变或活性下降，溶解和混匀时动作温和，忌剧烈震荡。

• 分装避免反复冻融（重要）：Ampicillin在反复冻融过程中易降解失活，建议小份分装（1ml/份），每次取用一管，避免反复冻融。

• 防护要求：操作时佩戴手套和护目镜，Ampicillin可能引起过敏反应，避免皮肤接触和吸入粉尘。

• 有效期：-20℃避光保存可稳定6个月至1年。若溶液出现变色、沉淀或浑浊，说明抗生素已降解或污染，应废弃。

• 注意卫星菌落：Ampicillin在固体培养基中易降解（β-内酰胺环不稳定），长时间培养（>16小时）可能出现卫星菌落（抗生素降解后周围出现小菌落），建议使用羧苄青霉素作为替代（更稳定）。

常见问题排查

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