SOC培养基 – 转化后复苏培养基（100ml 配制）

SOC培养基 – 转化后复苏培养基（100ml 配制）

产品用途

SOC培养基（Super Optimal Broth with Catabolite Repression）是分子生物学中转化后菌体复苏最常用的培养基，也是化学法和电转法感受态细胞转化后的标准复苏培养基。SOC培养基在SOB培养基基础上添加葡萄糖作为速效碳源，可为转化后受损的细胞提供快速能量补充，显著提高转化效率和阳性克隆率。本产品是热激转化后复苏、电转后复苏、感受态细胞质量检测等实验的标准培养基。

核心组分及终浓度

• 2%（W/V）Tryptone（胰蛋白胨） – 提供氮源、氨基酸和肽类

• 0.5%（W/V）Yeast Extract（酵母提取物） – 提供维生素、生长因子和核苷酸

• 0.05%（W/V）NaCl（氯化钠） – 维持渗透压和离子环境

• 2.5mM KCl（氯化钾） – 补充钾离子，调节渗透压

• 10mM MgCl₂（氯化镁） – 提供镁离子，稳定细胞膜和核酸结构

• 20mM 葡萄糖（Glucose） – 速效碳源和能量来源

配制方法（100ml 体系）

第一步：配制1M葡萄糖溶液

1. 称取 18g 葡萄糖，溶于约90ml去离子水中。

2. 充分搅拌至完全溶解后，定容至 100ml。

3. 使用 0.22μm无菌滤器过滤除菌。

4. 现配现用或4℃短期保存（不超过3天）。

第二步：配制SOC培养基

1. 按SOB培养基配方配制 100ml SOB培养基（2g Tryptone、0.5g Yeast Extract、0.05g NaCl、1ml 250mM KCl），调pH7.0后高压灭菌。

2. 灭菌后冷却至室温。

3. 在超净台内加入 2ml 除菌1M葡萄糖溶液（终浓度20mM），充分混匀。

4. 4℃密封保存。

各组分功能详解

使用方法

• 化学法转化后复苏：热激处理后，立即加入1ml SOC培养基，37℃振荡培养45～60分钟，然后涂布于含抗生素的筛选平板上。

• 电转法转化后复苏：电击后，立即加入1ml SOC培养基，37℃振荡培养60分钟，然后涂布于含抗生素的筛选平板上。

• 感受态细胞质量检测：用已知质粒转化感受态细胞，涂布于相应抗性平板，通过菌落数评估转化效率。

关键操作要点

• 葡萄糖不耐高温（最重要）：葡萄糖不耐高温，严禁高温高压灭菌（高温导致葡萄糖焦化，产生毒性物质），必须使用0.22μm滤器过滤除菌。过滤前检查滤器完整性，全程无菌操作。

• 葡萄糖需现配现用（重要）：葡萄糖溶液需现配现用或4℃短期保存（不超过3天），若出现浑浊、结块需弃用；过滤除菌后避免反复开盖，防止杂菌污染。

• SOB培养基冷却后加葡萄糖：SOB培养基需提前灭菌并冷却至室温后，再加入葡萄糖溶液，避免高温导致葡萄糖降解，影响培养基营养性能。

• 葡萄糖称量防潮：葡萄糖易吸潮，称量后立即密封试剂瓶。

• 转化后复苏条件：转化后复苏培养应使用37℃、200～250rpm振荡培养45～60分钟（化学法）或60分钟（电转法），使抗性基因充分表达后再涂布筛选平板。

SOC、SOB与LB培养基对比

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