NZCYM培养基 – λ噬菌体培养富营养培养基（1L 配制）

NZCYM培养基 – λ噬菌体培养富营养培养基（1L 配制）

产品用途

NZCYM培养基是分子生物学中λ噬菌体（λ phage）培养和文库构建的经典富营养培养基。与LB培养基相比，NZCYM添加了NZ胺（NZ amine，酪蛋白水解物）、Casamino Acid（酪蛋白氨基酸）和MgSO₄，可有效支持λ噬菌体的感染、增殖和包装。NZ胺提供噬菌体生长所需的特定营养，Casamino Acid补充氨基酸，MgSO₄提供噬菌体吸附宿主菌所必需的二价阳离子（Mg²⁺）。本产品广泛用于λ噬菌体文库的扩增和滴度测定、cDNA文库构建、噬菌体DNA制备等实验，是λ噬菌体相关研究的核心培养基。

核心组分及终浓度

• 0.5%（W/V）Yeast Extract（酵母提取物） – 提供维生素、生长因子和核苷酸

• 0.1%（W/V）Casamino Acid（酪蛋白氨基酸） – 提供游离氨基酸，补充营养

• 1%（W/V）NZ胺（NZ amine） – 酪蛋白水解物，提供噬菌体生长所需营养

• 0.5%（W/V）NaCl（氯化钠） – 维持渗透压和离子环境

• 0.2%（W/V）MgSO₄·7H₂O（七水硫酸镁） – 提供Mg²⁺，促进噬菌体吸附和增殖

• pH 7.0

配制方法（1L 体系）

1. 称取以下各组分，置于1L烧杯中：

• 5g Yeast Extract

• 1g Casamino Acid

• 10g NZ胺（NZ amine）

• 5g NaCl

• 2g MgSO₄·7H₂O

2. 加入约 800ml 去离子水，磁力搅拌至完全溶解。

3. 滴加 5N NaOH（约0.2ml），用pH计调节pH至 7.0（极缓慢滴加并持续搅拌，避免局部碱性过强破坏成分）。

4. 加去离子水定容至 1L，充分混匀。

5. 分装至适当容器（需耐高温高压、洁净无菌，灭菌前检查密封性）。

6. 高温高压灭菌（121℃，20min）。

7. 灭菌后4℃密封保存。冷却过程中避免密封过紧，防止容器因负压变形，同时减少杂菌污染风险。

各组分功能详解

NZCYM系列培养基对比

选择建议：

• NZCYM（含Casamino Acid）：λ噬菌体文库构建和扩增的首选，营养最丰富，支持高滴度噬菌体增殖。

• NZYM（不含Casamino Acid）：常规λ噬菌体培养和滴度测定。

• NZM（不含Yeast Extract和Casamino Acid）：需严格控制营养成分的实验。

使用方法

• λ噬菌体文库扩增：在NZCYM培养基中接种宿主菌（如LE392、C600等）和λ噬菌体，37℃振荡培养至裂解，收集噬菌体裂解液。

• λ噬菌体滴度测定：用NZCYM制备顶层琼脂（0.7%琼脂），与宿主菌和噬菌体稀释液混合后铺制平板，进行噬菌斑计数。

• cDNA文库构建：NZCYM是λ噬菌体cDNA文库包装和扩增的标准培养基。

• 噬菌体DNA制备：在NZCYM中大规模培养λ噬菌体，用于噬菌体DNA的提取和纯化。

• 固体平板：如需铺制NZCYM平板，在灭菌前加入15g/L琼脂。

关键操作要点

• 原料防潮与精准称量（重要）：Yeast Extract易吸潮结块，Casamino Acid、NZ胺易吸潮且纯度敏感，MgSO₄·7H₂O易风化。称量后立即密封各试剂瓶，操作快速高效，确保用量精准，避免影响溶解效率与培养基营养纯度。

• pH调节使用高浓度NaOH（重要）：使用5N NaOH（浓度较高），需极缓慢滴加并持续搅拌，避免局部碱性过强破坏成分。灭菌后pH轻微偏移（≤±0.1），不可二次调节，防止引入杂菌。

• 分装容器要求：分装容器需耐高温高压、洁净无菌，灭菌前检查密封性；冷却时避免密封过紧，防止容器因负压变形，同时减少杂菌污染风险。

• MgSO₄·7H₂O确认：本配方基于七水合硫酸镁，若使用无水MgSO₄，称样量需按分子量折算（MgSO₄·7H₂O分子量246.47，无水MgSO₄分子量120.37）。

常见问题排查

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