NZYM培养基 – λ噬菌体培养培养基（1L 配制）

NZYM培养基 – λ噬菌体培养培养基（1L 配制）

产品用途

NZYM培养基是分子生物学中λ噬菌体（λ phage）培养和滴度测定的常用培养基，与NZCYM培养基相比不含Casamino Acid（酪蛋白氨基酸），营养水平介于NZCYM和NZM之间。NZYM含有NZ胺（NZ amine，酪蛋白水解物）和酵母提取物，支持λ噬菌体在宿主菌中的有效感染、增殖和噬菌斑形成。NZ胺提供噬菌体生长所需特定营养，MgSO₄提供噬菌体吸附宿主菌所必需的二价阳离子（Mg²⁺）。本产品广泛用于λ噬菌体的常规培养、噬菌体滴度测定（噬菌斑检测）、λ噬菌体DNA的少量制备等实验，是NZCYM培养基的简化版，适合对营养要求不需最高的噬菌体实验。

核心组分及终浓度

• 0.5%（W/V）Yeast Extract（酵母提取物） – 提供维生素、生长因子和核苷酸

• 1%（W/V）NZ胺（NZ amine） – 酪蛋白水解物，提供噬菌体生长所需营养

• 0.5%（W/V）NaCl（氯化钠） – 维持渗透压和离子环境

• 0.2%（W/V）MgSO₄·7H₂O（七水硫酸镁） – 提供Mg²⁺，促进噬菌体吸附和增殖

• pH 7.0

配制方法（1L 体系）

1. 称取以下各组分，置于1L烧杯中：

• 5g Yeast Extract

• 10g NZ胺（NZ amine）

• 5g NaCl

• 2g MgSO₄·7H₂O

2. 加入约 800ml 去离子水，磁力搅拌至完全溶解。

3. 滴加 5N NaOH，用pH计调节pH至 7.0（极缓慢滴加并持续搅拌，避免局部碱性过强破坏成分）。

4. 加去离子水定容至 1L，充分混匀。

5. 分装至适当容器（需耐高温高压、洁净无菌，灭菌前检查密封性）。

6. 高温高压灭菌（121℃，20min）。

7. 灭菌后4℃密封保存。冷却过程中避免密封过紧，防止容器因负压变形，同时减少杂菌污染风险。

各组分功能详解

NZCYM、NZYM、NZM培养基对比

使用方法

• λ噬菌体滴度测定：用NZYM制备顶层琼脂（0.7%琼脂），与宿主菌和噬菌体稀释液混合后铺制平板，进行噬菌斑计数。

• λ噬菌体常规培养：在NZYM培养基中接种宿主菌和λ噬菌体，37℃振荡培养至裂解，收集噬菌体裂解液。

• 噬菌体DNA少量制备：在NZYM中培养λ噬菌体，用于少量噬菌体DNA的提取。

• 固体平板：如需铺制NZYM平板，在灭菌前加入15g/L琼脂。

关键操作要点

• 原料防潮与精准称量（重要）：Yeast Extract易吸潮结块，NZ胺易吸潮且纯度敏感，MgSO₄·7H₂O易风化。称量后立即密封各试剂瓶，操作快速高效，确保用量精准，避免影响溶解效率与培养基营养纯度。

• pH调节使用高浓度NaOH（重要）：使用5N NaOH（浓度较高），需极缓慢滴加并持续搅拌，避免局部碱性过强破坏成分。灭菌后pH轻微偏移（≤±0.1），不可二次调节，防止引入杂菌。

• 分装容器要求：分装容器需耐高温高压、洁净无菌，灭菌前检查密封性；冷却时避免密封过紧，防止容器因负压变形，同时减少杂菌污染风险。

• 不含Casamino Acid：NZYM与NZCYM的唯一区别是不含Casamino Acid（酪蛋白氨基酸）。与NZCYM相比营养略低，适用于对氨基酸补充要求不高的噬菌体实验，如常规滴度测定。

常见问题排查

相关推荐

• NZCYM培养基 – 含Casamino Acid的富营养版本

• NZM培养基 – 不含Yeast Extract和Casamino Acid的基础版本

• LB培养基 – 常规细菌基础培养基

• Φb×broth – P1及λ噬菌体扩增培养基

• 顶层琼脂（0.7% Agar） – 噬菌体滴度测定用

• λ噬菌体包装提取物 – λ噬菌体体外包装试剂