NZM培养基是分子生物学中λ噬菌体(λ phage)基础培养的培养基,与NZYM培养基相比不含Yeast Extract(酵母提取物) ,是NZ系列培养基中营养水平最低的配方。NZM仅含NZ胺(NZ amine,酪蛋白水解物)作为主要营养来源,NaCl维持渗透压,MgSO₄提供噬菌体吸附宿主菌所必需的二价阳离子(Mg²⁺)。本产品适用于对营养成分有严格控制的噬菌体实验、特定营养缺陷型宿主菌的噬菌体培养、以及作为NZYM/NZCYM的对照培养基等场景。
1%(W/V)NZ胺(NZ amine) – 酪蛋白水解物,提供噬菌体生长所需营养
0.5%(W/V)NaCl(氯化钠) – 维持渗透压和离子环境
0.2%(W/V)MgSO₄·7H₂O(七水硫酸镁) – 提供Mg²⁺,促进噬菌体吸附和增殖
pH 7.0
称取以下各组分,置于1L烧杯中:
10g NZ胺(NZ amine)
5g NaCl
2g MgSO₄·7H₂O
加入约 800ml 去离子水,磁力搅拌至完全溶解。
滴加 5N NaOH,用pH计调节pH至 7.0(极缓慢滴加并持续搅拌,避免局部碱性过强破坏成分)。
加去离子水定容至 1L,充分混匀。
分装至适当容器(需耐高温高压、洁净无菌,灭菌前检查密封性)。
高温高压灭菌(121℃,20min)。
灭菌后4℃密封保存。冷却过程中避免密封过紧,防止容器因负压变形,同时减少杂菌污染风险。
| 组分 | 浓度 | 功能 |
|---|---|---|
| NZ胺 | 1%(10g/L) | 酪蛋白水解物,提供噬菌体生长所需基础营养 |
| NaCl | 0.5%(5g/L) | 维持渗透压和离子环境 |
| MgSO₄·7H₂O | 0.2%(2g/L) | 提供Mg²⁺,噬菌体吸附宿主菌的必要辅助因子 |
| 对比项 | NZCYM | NZYM | NZM |
|---|---|---|---|
| Yeast Extract | 0.5% | 0.5% | 无 |
| Casamino Acid | 0.1% | 无 | 无 |
| NZ胺 | 1% | 1% | 1% |
| NaCl | 0.5% | 0.5% | 0.5% |
| MgSO₄·7H₂O | 0.2% | 0.2% | 0.2% |
| 营养水平 | 最高 | 中等 | 基础 |
| 主要用途 | λ文库构建、高滴度扩增 | 常规λ培养、滴度测定 | 基础噬菌体培养、对照实验 |
基础噬菌体培养:在NZM培养基中接种宿主菌和λ噬菌体,进行常规噬菌体培养。
营养对照实验:作为NZYM/NZCYM的对照培养基,用于研究酵母提取物或Casamino Acid对噬菌体生长的影响。
特定营养缺陷型宿主菌的噬菌体培养:用于需要在无酵母提取物条件下进行的噬菌体实验。
固体平板:如需铺制NZM平板,在灭菌前加入15g/L琼脂。
不含Yeast Extract:NZM与NZYM的唯一区别是不含Yeast Extract(酵母提取物)。营养来源仅限于NZ胺,适用于需要严格控制营养成分的实验。
pH调节使用高浓度NaOH(重要):使用5N NaOH(浓度较高),需极缓慢滴加并持续搅拌,避免局部碱性过强破坏成分。灭菌后pH轻微偏移(≤±0.1),不可二次调节,防止引入杂菌。
分装容器要求:分装容器需耐高温高压、洁净无菌,灭菌前检查密封性;冷却时避免密封过紧,防止容器因负压变形,同时减少杂菌污染风险。
NZ胺防潮:NZ胺易吸潮且纯度敏感,称量后立即密封试剂瓶,操作快速高效,确保用量精准。
MgSO₄·7H₂O确认:本配方基于七水合硫酸镁,若使用无水MgSO₄,称样量需按分子量折算(MgSO₄·7H₂O分子量246.47,无水MgSO₄分子量120.37)。
| 问题现象 | 可能原因 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 噬菌体滴度明显低于NZYM | 缺乏酵母提取物提供的生长因子 | 确认实验是否需要使用NZYM或NZCYM |
| 宿主菌生长缓慢 | 营养不足 | NZM为基础培养基,生长速度低于NZYM |
| 噬菌斑较小 | Mg²⁺浓度不足或营养不够 | 确认MgSO₄称量准确,考虑改用NZYM |
NZYM培养基 – 含Yeast Extract的NZM升级版
NZCYM培养基 – 含Yeast Extract和Casamino Acid的富营养版
LB培养基 – 常规细菌基础培养基
Φb×broth – P1及λ噬菌体扩增培养基
顶层琼脂(0.7% Agar) – 噬菌体滴度测定用
λ噬菌体包装提取物 – λ噬菌体体外包装试剂
电话
微信扫一扫