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NZM培养基 – 基础噬菌体培养基(1L 配制)

发布时间:2026-07-15      点击次数:0

NZM培养基 – 基础噬菌体培养基(1L 配制)

产品用途

NZM培养基是分子生物学中λ噬菌体(λ phage)基础培养的培养基,与NZYM培养基相比不含Yeast Extract(酵母提取物) ,是NZ系列培养基中营养水平最低的配方。NZM仅含NZ胺(NZ amine,酪蛋白水解物)作为主要营养来源,NaCl维持渗透压,MgSO₄提供噬菌体吸附宿主菌所必需的二价阳离子(Mg²⁺)。本产品适用于对营养成分有严格控制的噬菌体实验、特定营养缺陷型宿主菌的噬菌体培养、以及作为NZYM/NZCYM的对照培养基等场景。

核心组分及终浓度

  • 1%(W/V)NZ胺(NZ amine) – 酪蛋白水解物,提供噬菌体生长所需营养

  • 0.5%(W/V)NaCl(氯化钠) – 维持渗透压和离子环境

  • 0.2%(W/V)MgSO₄·7H₂O(七水硫酸镁) – 提供Mg²⁺,促进噬菌体吸附和增殖

  • pH 7.0

配制方法(1L 体系)

  1. 称取以下各组分,置于1L烧杯中:

    • 10g NZ胺(NZ amine)

    • 5g NaCl

    • 2g MgSO₄·7H₂O

  2. 加入约 800ml 去离子水,磁力搅拌至完全溶解。

  3. 滴加 5N NaOH,用pH计调节pH至 7.0极缓慢滴加并持续搅拌,避免局部碱性过强破坏成分)。

  4. 加去离子水定容至 1L,充分混匀。

  5. 分装至适当容器(需耐高温高压、洁净无菌,灭菌前检查密封性)。

  6. 高温高压灭菌(121℃,20min)。

  7. 灭菌后4℃密封保存。冷却过程中避免密封过紧,防止容器因负压变形,同时减少杂菌污染风险。

各组分功能详解

组分浓度功能
NZ胺1%(10g/L)酪蛋白水解物,提供噬菌体生长所需基础营养
NaCl0.5%(5g/L)维持渗透压和离子环境
MgSO₄·7H₂O0.2%(2g/L)提供Mg²⁺,噬菌体吸附宿主菌的必要辅助因子

NZCYM、NZYM、NZM培养基对比

对比项NZCYMNZYMNZM
Yeast Extract0.5%0.5%
Casamino Acid0.1%
NZ胺1%1%1%
NaCl0.5%0.5%0.5%
MgSO₄·7H₂O0.2%0.2%0.2%
营养水平最高中等基础
主要用途λ文库构建、高滴度扩增常规λ培养、滴度测定基础噬菌体培养、对照实验

使用方法

  • 基础噬菌体培养:在NZM培养基中接种宿主菌和λ噬菌体,进行常规噬菌体培养。

  • 营养对照实验:作为NZYM/NZCYM的对照培养基,用于研究酵母提取物或Casamino Acid对噬菌体生长的影响。

  • 特定营养缺陷型宿主菌的噬菌体培养:用于需要在无酵母提取物条件下进行的噬菌体实验。

  • 固体平板:如需铺制NZM平板,在灭菌前加入15g/L琼脂。

关键操作要点

  • 不含Yeast Extract:NZM与NZYM的唯一区别是不含Yeast Extract(酵母提取物)。营养来源仅限于NZ胺,适用于需要严格控制营养成分的实验。

  • pH调节使用高浓度NaOH(重要):使用5N NaOH(浓度较高),需极缓慢滴加并持续搅拌,避免局部碱性过强破坏成分。灭菌后pH轻微偏移(≤±0.1),不可二次调节,防止引入杂菌。

  • 分装容器要求:分装容器需耐高温高压、洁净无菌,灭菌前检查密封性;冷却时避免密封过紧,防止容器因负压变形,同时减少杂菌污染风险。

  • NZ胺防潮:NZ胺易吸潮且纯度敏感,称量后立即密封试剂瓶,操作快速高效,确保用量精准。

  • MgSO₄·7H₂O确认:本配方基于七水合硫酸镁,若使用无水MgSO₄,称样量需按分子量折算(MgSO₄·7H₂O分子量246.47,无水MgSO₄分子量120.37)。

常见问题排查

问题现象可能原因解决方法
噬菌体滴度明显低于NZYM缺乏酵母提取物提供的生长因子确认实验是否需要使用NZYM或NZCYM
宿主菌生长缓慢营养不足NZM为基础培养基,生长速度低于NZYM
噬菌斑较小Mg²⁺浓度不足或营养不够确认MgSO₄称量准确,考虑改用NZYM

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